EN
Tüm Kategoriler

ANASAYFA>Haberler>Sağlıklı bakım


Ganoderma Lucidum'dan polisakkaritler nasıl çıkarılır?

Tarih: 2019-11-11


Taksonomik üzerindeki Ganoderma lucidum, Aphyllopho rolleri Ganodermataceae Ganoderma'ya aittir. Eski ve modern farmakolojik ve klinik çalışmalar Ganoderma lucidum'un hastalıkları önleme ve iyileştirme ve yaşamı uzatma etkisine sahip olduğunu kanıtlamıştır. Ganoderma lucidum polisakarit, vücut tarafından üretilen serbest radikalleri önemli ölçüde çıkarabilen, vücuda serbest radikal hasarını önleyen, lipid peroksidasyonunu önleyen, hücreleri koruyan ve hücre yaşlanmasını geciktiren önemli bir yalancı SOD aktivitesine sahiptir. Vücudun immünosüpresyon tümörünü iyileştirebilir ve vücudun hipoksiye direnç gösterme yeteneğini geliştirir 、 Kan şekeri ve kan lipitlerini düzenler, karaciğeri korur, radyasyonu önler ve beyaz kan hücrelerini, anti-herpes virüsünü, anti-mutasyonu, anti-ülseri ve böylece üzerinde.
Polisakkaritlerin içeriğini belirlemek için, görünür UV spektrofotometrisi ve titrasyon gibi birçok yöntem vardır. UV spektrofotometresinde şu anda daha fazla rapor bulunmaktadır. Usul esas olarak, polisakaritin, absorbans ve içerik arasındaki lineer ilişkiyi belirlemek için bazı reaktiflerle reaksiyona girme prensibini kullanır, Farklı renk geliştirici ajanlara göre fenol sülfürik asit metodu, antron sülfürik asit metodu, salisilik olarak bölünebilir asit metodu, vs. Liu Yanping, 722 nm'de absorbansı antron sülfürik asidin renk geliştirici ajanları ile ölçmek için 625 spektrofotometresini kullandı. Farklı suşlarla kültürlenen Ganoderma lucidumdaki Ganoderma lucidum'un polisakarit içeriği belirlendi ve pigment, aktif karbon adsorpsiyonu ile uzaklaştırıldı ve oligosakarit,% 85 etanol ile çıkarıldı, temelde parazitleri ortadan kaldırdı. Mao Weilun ve diğ. bir antron sülfat çözeltisi ile renk geliştirmek için bir 751-GW spektrofotometre ve bir DV-6l0 spektrofotometre kullandı. Ganoderma lucidum kapsüllerindeki Ganoderma lucidum polisakaritlerinin 625 nm'de absorbansın belirlenmesi ve iki kez 80% asetik asit ile geri akışının belirlenmesiyle belirlenmesi, Oligosakaritin çıkarılması ve rahatsızlığın giderilmesi. Shi Juan ve diğ. fenol sülfürik asit kolorimetrisi ile 260nm'deki Ganoderma lucidum polisakaritlerinin içeriğini belirlemek için UV-752 spektrofotometre ve 488.7 UV-görülebilir spektrofotometre kullanılır. Zheng Xiukui ve diğ. UV-520 spektrofotometrik suyu ve 2100-dinitrosalisilik asit kolorimetrisi ile 3,5 nm'deki Ganoderma lucidum Kapsüllerinde Ganoderma lucidum polisakaritlerinin içeriğini belirledi. Zheng Xuezhen ve diğ. Polisakkarit içeriğini UV-210O UV-görünür spektrofotometrik meyve suyu ve 75lG spektrofotometrisi ile ölçtüm. Antron kükürt yönteminin, verilerdeki büyük dalgalanmalar ve kötü tekrarlanabilirlik gibi dezavantajları bulunduğu bildirilmektedir. Fenol sülfürik asit yöntemindeki belirleme koşulları ile detaylı bir şekilde çalışılabilir ve en iyi koşulları bulabilirseniz, yöntemin doğruluğu ve tekrarlanabilirliği geliştirilebilir. Ganoderma lucidum'un polisakarit muhtevasının hızlı ve doğru bir şekilde belirlenmesi amacına ulaşmak için, yazar, fenol sülfürik asit metodu ile Ganoderma lucidum polisakarit tayini koşullarını inceledi ve modifiye fenol sülfürik asit metodu ile belirlenen Ganoderma lucidum polisakarit muhtevasının verilerini daha fazla yaptı. kararlı ve doğru.


1. Malzemeler ve yöntemler

1.1 Deneysel malzeme
Test Ganoderma lucidum, Hunan Tarım Üniversitesi'nin Yenilebilir Mantar Araştırma Enstitüsü tarafından sağlandı; Hitachi UV-3310 Ultraviyole Spektrofotometresi; fenol, sülfürik asit ve mutlak etanol gibi reaktiflerin tümü Çin İlaç ve Biyolojik Ürünlerin Kontrolü Enstitüsü tarafından sağlandı.

1.2 Reaktif hazırlama
% 5 fenol çözeltisi: 50 g fenol (AR) tartın, eritmek için 100 ml distile su ekleyin ve bir ana likör hazırlayın. % 50 fenol çözeltisi, 10 ml 50% fenol çözeltisi alır, 100 ml'ye distile su eklenir ve şimdi kullanıma hazır olan bir% 5 fenol çözeltisi hazırlanır.

Referans çözeltinin hazırlanması: 105'te tartılır, sabit susuz glukoza kurutulur, bir 1 mg / ml çözeltisi yapmak için su ilave edilir, 5 ml hacimsel bir şişeye yerleştirilir, 10 ml ve 100 ml parçasını tartılır, Ölçeklendirmek için suyla seyreltilir ve 0.05 mg / ml ve 0.10 mg / ml glukoz çözeltisi elde etmek için çalkalayın.

1.3 Polisakkaritlerin Ekstraksiyonu
Hassasiyet, Soxhlet ekstraktına yerleştirilen Ganoderma lucidum tozu 2 g'yi tartın, su 90ml, 6 h için ısıtılmış geri akış; Birleştirin ve bir 100 ml hacimsel şişeye aktarın, su ile işarete kadar seyreltin, iyice çalkalayın, 10 ml 'i kesin olarak ölçün, 150 ml etanol ekleyin, iyice sallayın, 4 h için 12 ° C'de yerleştirin, çıkarın, santrifüjleyin, süpernatant Sıvı dökülür, çökeltiyi suyla çözün ve bir 50 ml volümetrik şişeye aktarın, hacme iyice çalkalayın, yani, numune çözeltisi ayrılır.


2. Test koşullarının belirlenmesi

2.1 Maksimum emme dalga boyunun seçimi
Susuz glukoz referans çözeltisi ve fenol sülfürik asit ile elde edilen Ganoderma lucidum test çözeltisi sırasıyla alınmış ve maksimum emme dalga boyunu belirlemek için 400 ila 700 nm'de taranmıştır. Sonuçlar, her ikisinin de 490 nm'de maksimum emilime sahip olduğunu göstermektedir.

2.2 Fenol ilavesinin miktarının seçimi
0.05 mg / ml glikoz çözeltisi ve Ganoderma lucidum test numunesi 1.0 ml, her bir yerde 6 ml stoperli test tüplerinde 15 parçaları yerleştirin, sırasıyla 5% 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0, 5.0, 15, 30, 1.0 Sülfürik asidin damıtılmış su ile 1.0 ml'ye seyreltilmesi, Çalkalayın ve hızlı bir şekilde ve 5 dk. 5 ml su, 490 ml% 5 fenol çözeltisi ile ilave edildi ve 1.0 ml'ye konsantre sülfürik asit ile boş bir çözelti halinde ilave edildi ve 1 nm'de emilim, spektrofotometre ile ölçüldü ve damıtılmış su, boşluk olarak kullanıldı. Test sonuçları, diğer koşullar sabit olduğunda, XNUMX% fenol miktarının artmasıyla absorbans değerinin artmadığını ve dozaj XNUMX ml olduğunda absorbansın en yüksek olduğunu, dolayısıyla optimum fenol miktarının olduğunu göstermektedir. XNUMX ml.

2.3 Sülfürik Asit ekleme miktarı seçimi
0.05 mg / ml glukoz çözeltisi ve Ganoderma lucidum test numunesi 1.0 parçaları için her biri 8 ml alın, bunları 10 ml durdurucu test tüplerine yerleştirin, 5% fenol çözeltisi ekleyin, 1.0, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0, 7.0, 8.0, 10 ml sülfürik asit, 30 ml'ye damıtılmış su ile tamamlayın, Hızlı bir şekilde çalkalayın ve karıştırın, 490 dakika boyunca oda sıcaklığında, 2.2 nm'de absorbansı spektrofotometri ile ölçün, madde 5 Metod preparasyonuna göre boyar. Test sonuçları, emilimin, diğer koşullar altında değişmeyen sülfürik asit çözeltisi miktarının artmasıyla arttığını ve emilimin, 5 ml'de değişmediğini göstermektedir. Bu nedenle, optimum miktarda sülfürik asit XNUMX ml'dir.

2.4 Gelişme kararlılığının belirlenmesi.
0.05 ml stoperli bir test tüpünde standart bir 1.0 mg / ml ve 10 ml distile su glikoz standart çözeltisi alın, 1.0 ml% 5 standart fenol çözeltisi ekleyin, iyice karıştırın ve hızla reaksiyona giren 5.0 ml konsantre sülfürik asit ekleyin Bir kaynar su banyosunda 10,30,60,90,120,150 ve 180 dakika boyunca, çıkarıldıktan hemen sonra oda sıcaklığına soğutuldu ve sonra absorbans, 490 nm'de ölçüldü. Boşluk, 2.2 yöntemine göre hazırlandı. Ölçülen absorbans değerleri sırasıyla 0.374 、 0.394 、 0.392 、 0.393 、 0.392 、 0.391 ve 0.392 idi. Zamanın uzaması polisakaritin çözünmesi için elverişli olduğu için, renk gelişimi 3 saat içinde sabittir, ancak emilim 30 dakikada en büyüğüdür. Bu nedenle, polisakarit içeriğinin ölçüm verimliliğini arttırmak için deneysel seçim, 30 dakikada gerçekleştirildi.

2.5 Renk sıcaklığı seçimi
Bir 0.05 ml durdurucu test tüpünde standart bir 1.0 mg / ml ve 10 ml distile su glükoz standart çözeltisi alın, 1.0 ml% 5 standart fenol çözeltisi ekleyin, iyice karıştırın ve hızlı bir şekilde 5.0 ml konsantre sülfürik asit ekleyin, karıştırın ve ayrı ayrı yer sıcaklığı, bir 25, 50, 75, 100 ° C 30 dakika su sıcaklığıdır ve çıkarıldıktan hemen sonra oda sıcaklığına soğutun, daha sonra 490 nm'de absorbansı ölçün. Boş sıvı için 2.2 maddesine bakın ve sonuçlar sırasıyla 0.434 、 0464 、 0.535 ve 0.556, Bundan, sıcaklığın yükselmesi, polisakaritin çözüldüğü ve absorbansın 100 ° 'de en yüksek olduğu görülebilir. C, polisakaritin en çok kaynayan suda çözündüğünü belirtir, bu nedenle renk geliştirme sıcaklığı 100 ° C olarak seçilir.

Seçme materyali ve bu makalede denemenin ayrıntılı tanıtımı, arkadaşlar test yöntemini biliyor mu?