EN
Vse kategorije

Domov>Novice>Zdrava nega


Kako izvleči polisaharide iz Ganoderme Lucidum?

Datum: 2019-11-11


Ganoderma lucidum na taksonomsko spada v aphyllopho rales Ganodermataceae Ganoderma. Starodavne in sodobne farmakološke in klinične študije so dokazale, da ima Ganoderma lucidum učinek preprečevanja in ozdravitve bolezni ter podaljšanje življenja. Polisaharid Ganoderma lucidum ima pomembno psevdo-SOD aktivnost, ki lahko znatno odstrani proste radikale, ki jih telo ustvari, prepreči poškodbe prostih radikalov v telesu, prepreči peroksidacijo lipidov, zaščiti celice in upočasni staranje celic. Lahko izboljša telesni imunosupresivni tumor in poveča sposobnost telesa, da se upira hipoksiji 、 Uravnava krvni sladkor in krvne lipide, ščiti jetra, preprečuje sevanje in zvišuje bele krvne celice, virus proti herpesu, proti mutaciji, proti čiru in tako naprej.
Obstaja veliko metod za določanje vsebnosti polisaharidov, na primer vidna UV spektrofotometrija in titracija. Trenutno je na voljo na UV spektrofotometru več poročil. Metoda v glavnem uporablja načelo, da polisaharid reagira z nekaterimi reagenti, da določi linearno razmerje med absorbcijo in vsebnostjo. Glede na različna barvila, ki jih razvijamo, ga lahko razdelimo na fenol žveplove kislinske metode, antronovo žvepleno kislinsko metodo, salicilno Liu Yanping je uporabil 722 spektrofotometer za merjenje vpojnosti pri 625 nm s pomočjo barvno razvijalcev antronov žveplove kisline. Vsebnost polisaharidov Ganoderma lucidum v Ganoderma lucidum, ki so ga gojili različni sevi, je bil pigment odstranjen z adsorpcijo aktivnega oglja in odstranjen oligosaharid s 85% etanolom, ki v osnovi odpravi motnje. Mao Weilun in sod. uporabili spektrofotometer 751 GW in spektrofotometer DV-6, da smo razvili barvo z raztopino antron-sulfata. Določanje polisaharidov Ganoderma lucidum v kapsulah Ganoderma lucidum z določitvijo absorbance pri 0 nm in dvakrat refluktirano z 625% ocetno kislino, odstranite oligosaharid in odstranite motnje. Shi Juan in sod. uporabljali spektrofotometer UV-80 in spektrofotometer, viden na UV, za določitev vsebnosti polisaharidov Ganoderma lucidum pri 260 nm s kolorimetrijo žveplove kisline. Zheng Xiukui in sod. določil vsebnost polisaharidov Ganoderma lucidum v kapsulah Ganoderma lucidum pri 752 nm s spektrofotometričnim sokom UV-488.7 in kolorimetrijo 520-dinitrosalicilne kisline. Zheng Xuezhen in sod. izmerili vsebnost polisaharidov s UV-vidnim UV-vidnim spektrofotometričnim sokom in 2100lG spektrofotometrijo. Poroča se, da metoda z antronovim žveplom obstaja pomanjkljivosti, kot so velika nihanja podatkov in slaba ponovljivost. Če je mogoče z določanjem pogojev v metodi fenola z žveplovo kislino podrobno preučiti in poiskati najboljše pogoje, se lahko natančnost in ponovljivost metode izboljšata. Da bi dosegel namen hitrega in natančnega določanja vsebnosti polisaharidov Ganoderma lucidum, je avtor preučil pogoje določanja polisaharida Ganoderma lucidum po metodi fenolne žveplove kisline in podatke o vsebnosti polisaharida Ganoderma lucidum določil po modificirani metodi fenolne žveplove kisline več stabilna in natančna.




1. Materiali in metode

1.1 Poskusno gradivo
Test Ganoderma lucidum je prispeval Raziskovalni inštitut za užitne glive s kmetijske univerze Hunan; ultravijolični spektrofotometer Hitachi UV-3310; vse reagente, kot so fenol, žveplova kislina in absolutni etanol, je zagotovil Kitajski nacionalni inštitut za nadzor farmacevtskih in bioloških izdelkov.

1.2 Priprava reagenta
5% raztopina fenola: Odtehtamo 50 g fenola (AR), dodamo 100 ml destilirane vode za raztapljanje in pripravimo matični liker. 50% raztopine fenola, vzemite 10 ml 50% fenolove raztopine, dodajte 100 ml destilirane vode in pripravite 5% raztopino fenola, ki je zdaj pripravljena za uporabo.

Priprava referenčne raztopine: Na 105 ℃ posušimo do konstantne brezvodne glukoze, dodamo vodo, da dobimo 1 mg / ml raztopine, nato tehtamo 5 ml in 10 ml del, damo v 100-mililitrsko bučko, razredčimo z vodo do lestvice in stresamo, da dobimo 0.05 mg / ml in 0.10 mg / ml raztopine glukoze.

1.3 Ekstrakcija polisaharidov
Natančno tehtamo prašek Ganoderma lucidum 2 g, damo v ekstraktor Soxhlet, dodamo 90 ml vode, segrevamo z refluksom 6 ur; ekstrakt združimo in prestavimo v 100-mililitrsko merilno bučko, razredčimo do oznake z vodo, dobro pretresemo, natančno izmerimo 10 ml, dodamo 150 ml etanola, dobro pretresemo, postavimo 4 ur na 12 ° C, odstranimo, centrifugiramo, supernatant tekočino dekantiramo, oborino raztopimo z vodo in prenesemo v 50-mililitrsko bučko, dobro pretresemo do prostornine, to je, da je raztopina vzorca zadržana.



2. Določitev pogojev preskusa

2.1 Izbira največje absorpcijske valovne dolžine
Brezvodno referenčno raztopino glukoze in preskusno raztopino Ganoderma lucidum, ki jo dobimo s fenolno žveplovo kislino, smo vzeli in skenirali pri 400 do 700 nm, da smo določili največjo valovno dolžino absorpcije. Rezultati kažejo, da imata oba maksimalno absorpcijo pri 490 nm.

2.2 Izbira količine dodatka fenola
Vzemite 0.05 mg / ml raztopine glukoze in testnega vzorca Ganoderma lucidum 1.0 ml vsako mesto po 6 delov v 15 ml epruvete zamaška, nato dodajte 5% raztopino fenola 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0 ml, dobro pretresite, dodajte 5.0 ml žveplove kisline, razredčimo do 15 ml z destilirano vodo, stresemo in mešamo na hitro in v vreli vodi 30 minut. 1.0 ml vode dodamo z 1.0 ml 5% raztopine fenola in dodamo 5 ml koncentrirane žveplove kisline kot slepo raztopino, absorbanco pri 490 nm pa izmerimo s spektrofotometrijo in destilirano vodo uporabimo kot slepo. Rezultati preskusa kažejo, da se ob drugih pogojih konstantna vrednost absorbance ne poveča s povečanjem količine 5% fenola, absorbcija pa je največja, kadar je odmerjanje 1.0 ml, zato je optimalna količina fenola 1 ml

2.3 Izbor količine žveplove kisline
Vzemite 0.05 mg / ml glukozne raztopine in Ganoderma lucidum testnega vzorca 1.0 ml, vsaka za 8 delov, dajte jih v 10 ml epruvete zamaške, dodajte 5% raztopino fenola 1.0 ml, pretresite in premešajte, dodajte 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0, 7.0, 8.0 ml žveplove kisline, dopolnimo z destilirano vodo do 10 ml, stresemo in hitro mešamo pri sobni temperaturi 30 minut, merimo absorbanco pri 490 nm s spektrofotometrijo, prazno v skladu s točko 2.2 Priprava metode. Rezultati preskusov kažejo, da se absorbance povečujejo s povečanjem količine raztopine žveplove kisline pod drugimi pogoji nespremenjene, absorbanca pa se ne spremeni pri 5 ml. Zato je optimalna količina žveplove kisline 5 ml.

2.4 Določitev stabilnosti v razvoju.
V 0.05 ml zaporni epruveti vzemite standardno raztopino glukoze 1.0 mg / ml in 10 ml destilirane vode, dodajte 1.0 ml 5% standardne raztopine fenola, dobro premešajte in hitro dodajte 5.0 ml koncentrirane žveplove kisline 10,30,60,90,120,150 in 180 minut v vreli vodni kopeli, ohladili na sobno temperaturo takoj po odstranitvi in ​​nato izmerili absorbanco pri 490 nm. Slepi del je bil pripravljen po metodi 2.2. Izmerjene vrednosti absorbance so bile 0.374 、 0.394 、 0.392、0.393 、 0.392、0.391 in 0.392. Ker je podaljšanje časa ugodno za raztapljanje polisaharida, je barvni razvoj stabilen v 3 urah, vendar je absorbanca največja pri 30 minutah. Zato smo za izboljšanje učinkovitosti merjenja vsebnosti polisaharidov poskusno izbirali pri 30 min.



2.5 Izbira barvne temperature
V 0.05 ml zaporni epruveti vzemite standardno raztopino glukoze 1.0 mg / ml in 10 ml destilirane vode, dodajte 1.0 ml 5% standardne raztopine fenola, dobro premešajte in na hitro dodajte 5.0 ml koncentrirane žveplove kisline, premešajte in ločeno temperatura v prostoru je 25, 50, 75, 100 ° C, segreva 30 minut vode, nato pa jo po odstranitvi takoj ohladimo na sobno temperaturo, nato izmerimo absorbanco pri 490 nm. Za prazno tekočino glejte točko 2.2, rezultati pa so 0.434、0464、0.535 in 0.556, iz tega je razvidno, da višja kot je temperatura, bolj se raztopi polisaharid in absorbanca je najvišja pri 100 ° C, kar pomeni, da se polisaharid najbolj raztopi v vreli vodi, zato je izbrana temperatura za barvo 100 ° C.

Izbirni material in podrobna predstavitev eksperimenta v tem članku, so prijatelji poznali njegovo testno metodo?