EN
Sve kategorije

POČETNA>vijesti>Zdrava njega


Kako izvaditi polisaharide iz Ganoderme Lucidum?

Datum: 2019-11-11


Ganoderma lucidum na taksonomskoj pripada Aphyllopho rales Ganodermataceae Ganoderma. Drevna i moderna farmakološka i klinička ispitivanja dokazala su da Ganoderma lucidum djeluje u sprečavanju i izlječenju bolesti i produžava život. Polisaharid Ganoderma lucidum ima značajno pseudo-SOD aktivnost kojom se mogu značajno ukloniti slobodni radikali koje tijelo stvara, sprečavaju oštećenja slobodnih radikala u tijelu, sprečavaju peroksidaciju lipida, štite stanice i odgađaju starenje stanica. Može poboljšati imuno-supresijski tumor i povećati sposobnost tijela da se odupire hipoksiji 、 On regulira šećer u krvi i lipide u krvi, štiti jetru, sprečava zračenje i podiže bijela krvna zrnca, virus protiv herpesa, anti-mutaciju, protiv čira i tako dalje na.
Mnogo je metoda za određivanje sadržaja polisaharida, poput vidljive UV spektrofotometrije i titracije. Trenutno je dostupno više izvještaja o UV spektrofotometru. Metoda se uglavnom koristi principom da polisaharid reagira s nekim reagensima kako bi odredio linearni odnos između apsorpcije i sadržaja. Prema različitim agensima koji se razvijaju u boji, može se podijeliti na metodu sulfatne kiseline u obliku fenola, metodu antronoporne kiseline, salicilnu kiselinska metoda, itd. Liu Yanping je koristio 722 spektrofotometar za mjerenje apsorpcije na 625 nm sredstvima koja razvijaju boju antrononske kiseline u boji. Utvrđen je sadržaj polisaharida Ganoderma lucidum u Ganoderma lucidum uzgajan različitim sojevima, a pigment je uklonjen adsorpcijom aktivnog ugljena i uklonjen oligosaharid sa 85% etanolom, u osnovi uklanjaju smetnje. Mao Weilun i dr. upotrijebio spektrofotometar od 751 GW i spektrofotometar DV-6 za razvoj boje s otopinom antron-sulfata. Određivanje polisaharida Ganoderma lucidum u kapsulama Ganoderma lucidum određivanjem apsorpcije na 0 nm i refluksirano dva puta sa 625% octenom kiselinom, ukloniti oligosaharid i ukloniti smetnje. Shi Juan i dr. upotrijebio spektrofotometar UV-80 i spektrofotometar vidljiv na UV da bi se odredio sadržaj polisaharida Ganoderma lucidum na 260 nm koloimetrijskom sumpornom kiselinom. Zheng Xiukui i dr. odredio je sadržaj polisaharida Ganoderma lucidum u Ganoderma lucidum kapsulama na 752 nm sa spektrofotometrijskim sokom UV-488.7 i kolorimetrijom 520-dinitrosalicilne kiseline. Zheng Xuezhen i dr. izmerio je sadržaj polisaharida UV-vidljivim spektrofotometričnim sokom i 2100lG spektrofotometrijom. Navodi se da metoda antronovog sumpora postoji kao nedostatak poput velikih fluktuacija podataka i loše ponovljivosti. Ako se uvjeti određivanja metodom fenolne sumporne kiseline mogu detaljno proučiti i pronaći najbolji uvjeti, može se poboljšati točnost i ponovljivost metode. Da bi postigao svrhu brzog i preciznog određivanja sadržaja polisaharida Ganoderma lucidum, autor je proučavao uslove određivanja polisaharida Ganoderma lucidum metodom fenolne sumporne kiseline, a podatke o sadržaju polisaharida Ganoderma lucidum odredio modifikovanom metodom fenola sumporne kiseline više stabilan i precizan.


1. materijali i metode

1.1 Eksperimentalni materijal
Test Ganoderma lucidum pružio je Istraživački institut jestivih gljivica na Poljoprivrednom univerzitetu Hunan; Hitachi UV-3310 ultraljubičasti spektrofotometar; Kineski nacionalni institut za kontrolu farmaceutskih i bioloških proizvoda osigurao je reagense poput fenola, sumporne kiseline i apsolutnog etanola.

1.2 Priprema reagensa
5% otopina fenola: Odvažite 50 g fenola (AR), dodajte 100 ml destilirane vode za otapanje i pripremite matičnicu. 50% fenolne rastvore, uzmite 10 ml 50% fenolne otopine, dodajte destiliranu vodu u 100 ml i pripremite 5% fenolovu otopinu, koja je sada spremna za upotrebu.

Priprema referentne otopine: Na 105 ℃ osušenoj do konstantne bezvodne glukoze odvažite se, dodajte vode da biste napravili otopinu od 1 mg / ml, zatim izvažite 5 ml i 10 ml, stavite u volumensku tikvicu od 100 ml, razrijedite vodom do skale protresite da biste dobili 0.05 mg / ml i 0.10 mg / ml otopine glukoze.

1.3 Ekstrakcija polisaharida
Precizni vaga Ganoderma lucidum prah 2 g, stavi se u ekstraktor Soxhlet, doda se voda 90 ml, zagreva refluks 6 h; kombinirati ekstrakt i prenijeti u volumensku tikvicu od 100 ml, razrijediti do oznake vodom, dobro protresti, precizno izmjeriti 10 ml, dodati 150 ml etanola, dobro protresti, staviti na 4 ° C 12 h, izvaditi, centrifugirati, supernatant tečnost se dekantira, rastvara talog vodom i prebaci u volumensku tikvicu od 50 ml, dobro protrese do volumena, odnosno otopina uzorka je zadržana.


2. Utvrđivanje uvjeta ispitivanja

2.1 Izbor maksimalne talasne dužine apsorpcije
Bezvodna referentna otopina glukoze i ispitna otopina Ganoderma lucidum dobivena fenolnom sumpornom kiselinom uzeta su i skenirana na 400 do 700 nm kako bi se odredila maksimalna valna dužina apsorpcije. Rezultati pokazuju da obojica imaju maksimalnu apsorpciju na 490 nm.

2.2 Izbor količine dodatka fenola
Uzmite 0.05 mg / ml otopine glukoze i testni uzorak Ganoderma lucidum 1.0 ml svako mjesto 6 dijelova u epruvete s zatvaračem od 15 ml, odnosno dodajte 5% otopinu fenola 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0 ml, dobro protresite, dodajte 5.0 ml sumporne kiseline, razrijediti do 15 ml destilovanom vodom, protresti i brzo mešati u kipućoj vodi 30 minuta. 1.0 ml vode dodano je 1.0 ml 5% -tne otopine fenola, te dodano u 5 ml koncentrirane sumporne kiseline kao slijepa otopina, a apsorbancija na 490 nm izmjerena je spektrofotometrijom, a destilirana voda je korištena kao prazna. Rezultati ispitivanja pokazuju da, kada su ostali uvjeti stalni, vrijednost apsorbancije se ne povećava s povećanjem količine 5% fenola, a apsorbancija je najveća kad je doza 1.0 ml, tako da je optimalna količina fenola 1 ml.

2.3 Izbor količine sumporne kiseline
Uzmite 0.05 mg / ml otopine glukoze i testni uzorak Ganoderma lucidum od 1.0 ml svaki za 8 dijelova, stavite ih u epruvete s zatvaračem od 10 ml, dodajte 5% otopinu fenola 1.0 ml, protresite i promiješajte, dodajte 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0, 7.0, 8.0 ml sumporne kiseline, dopuniti 10 ml destiliranom vodom, protresti i brzo miješati, na sobnoj temperaturi 30 min, izmjeriti apsorbanciju na 490 nm spektrofotometrijom, prazno prema tački 2.2 Priprema metode. Rezultati ispitivanja pokazuju da se apsorbancija povećava s povećanjem količine otopine sumporne kiseline pod drugim uvjetima nepromijenjena, a apsorbancija je nepromijenjena na 5 ml. Zbog toga je optimalna količina sumporne kiseline 5 ml.

2.4 Određivanje stabilnosti u razvoju.
Uzmite standardnu ​​otopinu glukoze od 0.05 mg / ml i 1.0 ml destilirane vode u epruveti sa zatvaračem od 10 ml, dodajte 1.0 ml 5% standardne otopine fenola, dobro promiješajte i brzo dodajte 5.0 ml koncentrirane sumporne kiseline, reagirajući 10,30,60,90,120,150 i 180 minuta u kipućoj vodenoj kupelji, ohladila se na sobnu temperaturu odmah nakon uklanjanja, a zatim je izmjerena apsorbancija na 490 nm. Praznina je pripremljena u skladu s postupkom 2.2. Izmjerene vrijednosti apsorpcije bile su 0.374 、 0.394 、 0.392 、 0.393 i 0.392. Budući da je produženje vremena pogodno za otapanje polisaharida, razvoj boje je stabilan u roku od 0.391 sata, ali je apsorbancija najveća na 0.392 min. Zbog toga, za poboljšanje efikasnosti merenja sadržaja polisaharida, eksperimentalna selekcija izvršena je na 3 min.

2.5 Izbor temperature boje
Uzmite standardnu ​​otopinu glukoze od 0.05 mg / ml i 1.0 ml destilirane vode u epruveti sa zatvaračem od 10 ml, dodajte 1.0 ml 5% standardne otopine fenola, dobro promiješajte i brzo dodajte 5.0 ml koncentrirane sumporne kiseline, promiješajte i odvojeno temperatura temperature je 25, 50, 75, 100 ° C toplina vode u trajanju od 30 minuta i Odmah se ohladi na sobnu temperaturu nakon uklanjanja, a zatim izmjerite apsorbanciju na 490 nm. Pogledajte praznu tekućinu u točki 2.2, a rezultati su 0.434、0464、0.535 i 0.556, Iz ovoga se vidi da što je viša temperatura, više se rastvara polisaharid, a apsorbancija je najveća na 100 ° C, što ukazuje da se polisaharid najviše rastvara u kipućoj vodi, tako da je odabrana temperatura razvoja boje 100 ° C.

Materijal za odabir i detaljni uvod eksperimenta u ovom članku, da li su prijatelji znali njegovu metodu ispitivanja?